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細胞侵襲/遷移實驗(Transwell)

Transwell小室底層有一張通透性的膜(一般為聚碳酸酯膜),將其放置于孔板中,小室內稱上室,培養(yǎng)板內稱下室。由于聚碳酸酯膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內的細胞。應用Transwell可研究下層培養(yǎng)液中的成分對上室細胞生長、運動等的影響。

1.細胞共培養(yǎng):

1)下室中接種能夠分泌細胞因子或特定蛋白產物的細胞,在上室中接種效應細胞;

2) 按照實驗設計培養(yǎng)一定時間;

3) 檢測效應細胞的活力改變,亦可使用流式細胞儀檢測細胞凋亡率,WB檢測細胞表面分子及凋亡相關分子的表達。

2.趨化實驗:

1) 在上室中接種相應細胞,下室中接種能分泌細胞因子的細胞或加入特定細胞因子的培養(yǎng)基;

2)計數進入下室的細胞,以反應分泌產物或特定因子對細胞的趨化作用。

3.腫瘤細胞遷移實驗

1)在上室接種效應細胞,下室中加入待測樣品(化合物、提取物或混合物等);

2)計數進入下室的細胞量,可評價待測樣品對腫瘤細胞遷移的影響。

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