目的 探究METTL3(methyltransferase like 3,METTL3)介導(dǎo)的 m6A(N6 甲基腺苷)修飾對氧化低密 度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)誘導(dǎo)的小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞(RAW264. 7)焦亡的影響。
方法 ox-LDL(50 μg / mL)誘導(dǎo) RAW264. 7 細(xì)胞 24 h 后,對 METTL3 進(jìn)行敲低或過表達(dá),檢測培養(yǎng)細(xì)胞 RNA m6A 甲基化水平,熒光定量 PCR 和 Western blot 法檢測 METTL3 和細(xì)胞焦亡相關(guān)基因 NLRP3、NF-κB p65、GSDMD-N、 Caspase-1 mRNA 和蛋白表達(dá)水平,乳酸脫氫酶(LDH)細(xì)胞毒性檢測細(xì)胞死亡率,酶聯(lián)免疫吸附法檢測炎癥細(xì)胞因 子 IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α 和 IL-10 的含量。
結(jié)果 ox-LDL 能夠促進(jìn) RAW264. 7 巨噬細(xì)胞 METTL3 的表達(dá)和 RNA m6A 甲基化水平,同時也能促進(jìn)炎癥因子 IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α 的分泌(P<0. 05),降低 IL-10(P<0. 05)的表達(dá)。 在 ox-LDL 誘導(dǎo)基礎(chǔ)上,METTL3 過表達(dá)后,RNA m6A 甲基化水平升高,NLRP3、NF-κB p65、GSDMD-N、Caspase-1 表 達(dá)顯著增加,促炎細(xì)胞因子 IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-18 水平升高,抗炎細(xì)胞因子 IL-10 水平降低,LDH 釋放增加, METTL3 敲低后結(jié)果相反。
結(jié)論 METTL3 介導(dǎo)的 m6A 修飾能夠顯著促進(jìn) ox-LDL 誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞焦亡和炎癥 反應(yīng)。
閱讀原文：METTL3介導(dǎo)的m6A修飾對ox-LDL誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞焦亡的影響.pdf
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