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CUIM和UCSF的研究者們和他們的小鼠朋友們發(fā)現(xiàn)了這群“好怕怕”的細(xì)胞，研究成果“Anxiety Cells in a Hippocampal-Hypothalamic Circuit”發(fā)表在最新的《Neuron》上哦！
高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)（Elevated plus maze, EPM）
曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)（Open field test, OFT）
這兩種方法的原理都是基于小鼠的趨避性——也就是小鼠畏懼開(kāi)闊、未知、可能具有危險(xiǎn)的場(chǎng)所，而天性喜歡“貼墻”活動(dòng)。
南模生物可提供單項(xiàng)或成套的小鼠行為學(xué)分析服務(wù)
由開(kāi)放臂（open arm）和封閉臂（close arm）各兩條組成，呈十字形交叉，交叉部分為中央?yún)^(qū)域。整個(gè)十字形迷宮距地面有一定的高度。
小鼠面對(duì)開(kāi)放臂產(chǎn)生好奇心而想要探索，同時(shí)又有著趨暗避明的天性，兩者之間發(fā)生探究與回避的沖突行為，產(chǎn)生焦慮心理。可以通過(guò)比較小鼠在開(kāi)放臂和封閉臂內(nèi)的滯留時(shí)間和路程來(lái)評(píng)價(jià)小鼠的焦慮行為。一般認(rèn)為，小鼠在開(kāi)放臂中滯留的時(shí)間和路程越多，小鼠的焦慮水平越低。
裝置一般有一個(gè)正方形的箱子，頂部有攝像機(jī)。
這個(gè)正方形的場(chǎng)地可以劃分為中央?yún)^(qū)域（center）和周邊區(qū)域（periphery）。
小鼠如果在中央?yún)^(qū)域的活動(dòng)越多，說(shuō)明小鼠的焦慮水平相對(duì)就越低。當(dāng)然，評(píng)價(jià)焦慮水平的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)還有很多，比如：穿梭箱試驗(yàn)（Shuttlebox test），明暗探索實(shí)驗(yàn)（Light/Dark Exploration Test），社交活動(dòng)試驗(yàn) (Social interaction test) 等等。以后我們?cè)僖灰唤榻B。
1.利用神經(jīng)元鈣離子成像技術(shù)（calcium imaging），將小型顯微鏡插入實(shí)驗(yàn)小鼠的大腦中，記錄大腦海馬區(qū)域中細(xì)胞的活動(dòng)情況。
在EPM中，當(dāng)小鼠探索開(kāi)放臂時(shí)，海馬腹側(cè)CA1（Ventral CA1, vCA1）區(qū)域的神經(jīng)元細(xì)胞活動(dòng)明顯增加。當(dāng)小鼠在開(kāi)放臂中向高架下方探頭時(shí)，vCA1神經(jīng)元活性進(jìn)一步升高。此外，vCA1激活水平與小鼠對(duì)開(kāi)放臂的躲避程度呈正相關(guān)。小鼠越焦慮，vCA1神經(jīng)元細(xì)胞越活躍。
2.利用光遺傳學(xué)技術(shù)使vCA1神經(jīng)元細(xì)胞沉默，小鼠就會(huì)放棄相對(duì)安全的封閉臂，反而徘徊在EPM開(kāi)放臂上，遠(yuǎn)離防護(hù)墻。
3.在抑制性GABA能神經(jīng)元特異性Cre小鼠（vGAT-Cre）中使用鈣離子成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)，vCA1抑制性中間神經(jīng)元并未參與到與焦慮相關(guān)的行為（對(duì)開(kāi)放臂的探索）中。
4.基底杏仁核（BA）和外側(cè)下丘腦（LHA）是兩個(gè)與焦慮相關(guān)行為、習(xí)得性恐懼、壓力抑郁密切相關(guān)的腦區(qū)。
利用光遺傳學(xué)技術(shù)發(fā)現(xiàn)，vCA1神經(jīng)元既投射到BA，也投射到LHA。
用兩種不同的逆行示蹤染料染色發(fā)現(xiàn)，投射到BA的vCA1神經(jīng)元與投射到LHA的vCA1神經(jīng)元并不重疊，是兩群不同的細(xì)胞。
5.這兩種不同的vCA1投射回路對(duì)小鼠的行為有不同的作用：
激活vCA1-BA投射后，小鼠場(chǎng)景恐懼條件反射的建立受到干擾；而激活vCA1-LHA投射不影響場(chǎng)景恐懼的編碼與讀取。
激活vCA1-LHA投射反而使小鼠在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中中央?yún)^(qū)域的探索顯著減少，增加了小鼠的焦慮水平；而激活vCA1-BA投射不影響小鼠的焦慮行為。
6.利用可逆行感染投射神經(jīng)元的2型犬腺病毒CAV2-Cre，分別注射在BA或LHA區(qū)域，結(jié)合鈣離子成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)，EPM實(shí)驗(yàn)中，vCA1-LHA神經(jīng)元在開(kāi)放臂與封閉臂之間的活性變化差異更明顯，而且被開(kāi)放臂激活的焦慮細(xì)胞中vCA1-LHA神經(jīng)元也占據(jù)主力。
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