目的 探究清熱解毒方對痛風(fēng)小鼠抗炎作用及對腸道菌群的影響。
方法 將 ４０ 只 ７～ ８ 周齡、體重 ２０～ ２２ ｇ 的 ＳＰＦ 級 Ｃ５７ＢＬ／ ６ 雄性小鼠隨機(jī)分為空白組（ＣＯＮ 組）、模型組（ＭＯＤ 組）、別嘌醇組（ＡＬＬＯ 組）、清熱解 毒方組（ＱＲＪＤ 組），第 １～ ３５ 天每天早上 ＣＯＮ 組灌胃 １０ ｇ ／ ０.１ ｍＬ 羧甲基纖維素，其余各組均灌胃氧嗪酸鉀（５００ ｍｇ ／ ｋｇ）＋酵母膏（１０ ｇ ／ ｋｇ）混懸液制備高尿酸血癥小鼠模型；第 ２９ 天在異氟烷麻醉下，往 ＣＯＮ 組小鼠右踝關(guān)節(jié)注 射 ５０ μＬ 無菌羧甲基纖維素，其余各組小鼠右踝關(guān)節(jié)注射等量尿酸鈉溶液（５０ ｍｇ ／ ｍＬ）制備痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型，同 時(shí)各組每天灌服相應(yīng)藥物進(jìn)行治療；第 ３５ 天取材，取材小鼠禁食不禁水 ６ ｈ，檢測血尿酸、血肌酐、尿素氮等血液指 標(biāo)，踝關(guān)節(jié)蘇木精－伊紅、番紅－固綠染色；踝關(guān)節(jié)免疫組化檢測白細(xì)胞介素－１０（ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ １０，ＩＬ?１０）、轉(zhuǎn)化生長因 子－β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ?β１，ＴＧＦ?β１）抗炎指標(biāo)；收集小鼠盲腸內(nèi)容物，采用 １６Ｓ ｒＤＮＡ 高通量測序法檢測腸 道菌群變化。
結(jié)果 （１）用藥治療 ７ ｄ 后，與 ＭＯＤ 組相比，ＱＲＪＤ 組能有效降低疾病模型小鼠血尿酸（Ｐ＜０.００１）、 肌酐（Ｐ＜０.０１）、尿素氮（Ｐ＜０.０５）濃度，有效保護(hù)腎功能。 （２）病理結(jié)果提示，與 ＭＯＤ 組相比，蘇木精－伊紅染色發(fā) 現(xiàn) ＱＲＪＤ 組治療后，關(guān)節(jié)滑膜增生有所減少，炎癥細(xì)胞浸潤得到減輕；番紅－固綠發(fā)現(xiàn)中藥復(fù)方軟骨排列較前有序， 軟骨破壞較 ＭＯＤ 組減輕，基質(zhì)未見失染。 （３）踝關(guān)節(jié)免疫組化結(jié)果提示 ＣＯＮ 組、ＭＯＤ 組 ＩＬ?１０、ＴＧＦ?β１ 未見明顯 升高；與 ＭＯＤ 組相比，ＱＲＪＤ 組的 ＩＬ?１０、ＴＧＦ?β１ 表達(dá)升高（Ｐ＜０.０５）。 （４）腸道菌群交互關(guān)系、多樣性上，與 ＣＯＮ 組 相比，ＭＯＤ 組特有的 ＯＴＵｓ 數(shù)目增加 ７５ 個(gè)，而 ＱＲＪＤ 能減少 ＭＯＤ 特有的 ＯＴＵｓ 數(shù)量，更接近 ＣＯＮ 組；４ 組間的 α 多 樣性未見明顯差異（Ｐ＞０.０５），而 β 多樣性發(fā)現(xiàn) ＱＲＪＤ 組的菌群組成更趨向于 ＣＯＮ 組水平（Ｐ ＝ ０.００１）。 （５）腸道 菌群差異分析結(jié)果顯示，與 ＣＯＮ 組相比，ＭＯＤ 組 Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃａｃｅａｅ ｓｐｐ． 、Ｄｕｂｏｓｉｅｌｌａ ｓｐ． 、Ｔｙｚｚｅｒｅｌｌａ ｓｐ． 、Ｉｌｅｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ． 和 Ｂａｃｔｅｒｏｉｄａｌｅｓ ｓｐｐ． 等豐度增高（Ｐ＜ ０.０５）；與 ＭＯＤ 組對比，ＱＲＪＤ 組 Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． 、Ｌｉｇｉｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． 和 Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｐ． 等豐度上升（Ｐ＜０.０５），且腸道菌群相互作用圖顯示菌群之間存在相互作用。 （６）腸道菌群與腎功 能、抗炎因子相關(guān)性分析中，Ｄｕｂｏｓｉｅｌｌａ ｓｐ． 、Ｔｙｚｚｅｒｅｌｌａ ｓｐ． 、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄａｌｅｓ ｓｐｐ． 的相對豐度與 ＳＵＡ、ＳＣＲ 呈顯著正相關(guān) （Ｐ＜０.０５）；而 Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． 、Ｌｉｇｉｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． 、Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ ｓｐｐ． 與 ＩＬ?１０、ＴＧＦ?β１ 抗炎因子呈正相關(guān)，其中與 ＴＧＦ?β１ 較為顯著（Ｐ＜０.０５）。 （７）ＣＯＧ 功能預(yù)測提示 ＱＲＪＤ 組功能集中于無機(jī)離子轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝、碳水化合物運(yùn)輸與代謝等。
結(jié)論 ＱＲＪＤ 能有效調(diào)節(jié)免疫炎癥－腸道微生態(tài)紊亂從而治療痛風(fēng)疾病，推測其防治痛風(fēng)的機(jī)制是調(diào)節(jié) 腸道菌群多樣性以及調(diào)控 Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃａｃｅａｅ ｓｐｐ． 、Ｄｕｂｏｓｉｅｌｌａ ｓｐ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． 等差異菌群豐度實(shí)現(xiàn)治療痛風(fēng)的 目的。
閱讀原文：基于免疫炎癥－腸道微生態(tài)探討清熱解毒方對痛風(fēng)小鼠治療作用的研究.pdf
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