目的 探究小鼠小腸固有層單細(xì)胞懸液制備的最佳酶消化法。
方法 采集 10 根長(zhǎng)度一致的小鼠 小腸,隨機(jī)分為兩組,每組分別采用以膠原酶 A 或膠原酶 VIII 為主的酶消化法制備固有層單細(xì)胞懸液,比較這兩種 酶消化法對(duì)單細(xì)胞懸液細(xì)胞獲得率、細(xì)胞活性和細(xì)胞表面抗原的影響,然后對(duì)較優(yōu)酶消化法制備的單細(xì)胞懸液進(jìn) 行流式檢測(cè)。
結(jié)果 與以膠原酶 VIII 為主的酶消化法相比,以膠原酶 A 為主的酶消化法可以獲得更高的細(xì)胞產(chǎn)量 (9.48±1.10)×10 9 vs(4.18±1.02)×10 9 、活細(xì)胞比例(86.36±3.32)% vs(61.62±10.93)%以及活性 CD45 +細(xì)胞比例 (57.19±5.11)% vs(26.01±11.44)%、活性 CD3 +細(xì)胞比例(8.73±2.89)% vs(4.52±2.49)%、活性 CD4 +細(xì)胞比例 (6.19±2.09)% vs(3.22±1.91)%和活性 B220 +細(xì)胞比例(15.06±4.27)% vs(5.07±2.20)%,為后續(xù)流式檢測(cè)提供 了高質(zhì)量細(xì)胞。
結(jié)論 以膠原酶 A 為主的酶消化法更適合于小鼠小腸固有層單細(xì)胞懸液的制備。
閱讀原文:小鼠腸道固有層單細(xì)胞懸液制備的酶消化法比較研究.pdf